药品监督管理局组织起草了《化妆品毒理学试验方法样品前处理通则》等19项制修订项目并形成相应检验方法,经化妆品标准专家委员会全体会议审议通过,于2024年3月21日予以发布。其中《化妆品毒理学试验方法样品前处理通则》的 <光反应性活性氧(ROS)测定试验方法>为新增检验方法,纳入《化妆品安全技术规范(2015年版)》,自2024年12月1日起实施。
ROS测定的试验原理:
一些具有光反应性的化学物质暴露于紫外线时,吸收某一波长光子,诱导发色团激发,激发能量转移到氧分子上,发生光化学反应,产生活性氧(包括单线态氧SO和超氧阴离子SA),活性氧是光毒性反应中的重要中间物质。单线态氧和咪唑反应生成的过氧化物中间体对N,N-二甲基-4-亚硝基苯胺(RNO)具有漂白作用,使其在440 nm下的吸光度降低。超氧阴离子与氯化硝基四氮唑蓝(NBT)反应生成NBT+,其在560 nm波长下具有光吸收。 本试验方法通过分光光度法测定化学物质经紫外线照射后对RNO在440 nm下吸光度的减少及对NBT+在560 nm下吸光度的增加来判断该化学物质是否具有光反应性。
1.选择合适的光源用于提供紫外线和可见光的照射,通过滤光片减少波长小于290 nm的UVC,使光源尽量接近室外日光。推荐的测试条件如下:
a) 配备滤光片的太阳模拟器(减少紫外线波长<290 nm)
— 辐照度:1.8 mW/cm2至2.2 mW/cm2,照射1小时(例如,LUYOR-3450的指标设置值为2.1mW/cm2),
— UVA光照剂量:6.5 J/cm2至7.9 J/cm2。
b) 配备滤光片的太阳模拟器(减少紫外线波长<300 nm)
— 辐照度:3.0 mW/cm2至5.0 mW/cm2,照射1小时。
— UVA光照剂量:11 J/cm2至18 J/cm2(见附录B)。
2.测试条件根据实际选择合适具体条件。
3.ROS的产生受温度影响,太阳光模拟器应配备温度控制装置,光照期间温度在20℃~29℃。
1.和传统的高压汞灯的太阳光模拟器相比,LUYOR-3450采用的是低压汞灯光源,没有高热量产生。
2.采用自滤色紫外线灯管,没有290nm以下的紫外线输出。
3.内置高精度紫外线传感器,能够实时监测紫外线强度。
4.微处理器控制紫外辐照能量,达到预设的辐照剂量自动停止运行。
5.双风扇冷却,确保辐照腔保持室温状态。